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羊肚菌菌种分离和培养技术

2021-01-29 02:45:45

  黑龙江食用菌小编介绍羊肚菌菌种分离和培养技术

  1、菌种分离

  目前可以纯人工栽培的羊肚菌品种有变红羊肚菌、梯纹羊肚菌、尖顶羊肚菌、六妹羊肚菌、七妹羊肚菌以及粗柄羊肚菌、普通羊肚菌。当前我国的栽培品种主要以黑色品系为主,梯纹羊肚菌占总栽培面积的95%以上,产量及稳定性好;六妹羊肚菌和七妹羊肚菌次之,产量稳定性与梯纹羊肚菌相当,开发潜力较大;黄色品系粗柄羊肚菌栽培规模较小,产量及稳定性有待进一步提高。

  采用孢子分离、组织分离或基质分离法获得纯菌种。分离物必须经过纯化鉴定,并经出菇试验方可大规模栽培使用。通常情况下,分离物在20℃~25℃培养2d即可萌动,3d左右即可形成初生菌落,挑取萌发菌落的尖端进行纯化或扩大培养。

  2、母种培养

  各种真菌培养基均适合羊肚菌菌丝的生长,通常情况下,菌丝在25%条件下培养4d~7d即可长满试管,5d~8d开始形成菌核。

  母种培养基:PDA培养基,马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、琼脂18g~20g,自来水1000mL,pH值自然;CYM完全培养基:葡萄糖20g、蛋白胨2g、酵母膏2g、卧磷酸氢二钾1g、硫酸镁0.5g、磷酸二氢钾0.46g、琼脂粉20g,蒸馏水1000mL。

  优良母种表现为菌丝生长均匀,初期菌丝密集洁白,粗壮,气生菌丝旺盛,爬壁力强,后期菌丝产生浅棕黄色色素,菌落浅棕色至棕色。大部分羊肚菌菌株在培养4d~6d开始产生菌核,菌核初期白色,针尖大小,后期芝麻粒至绿豆粒大小,分散或凝集呈片状,菌核随着生长时间增长开始变黄,最终为棕黄色。

黑龙江食用菌

  3、原种、栽培种培养基

  原种、栽培种培养基配方基本相同,常压或高压灭菌后使用,常用配方如下:

  杂木屑70%、麦麸20%、生石灰1%~2%、石膏1.5%、腐殖质土10%;

  杂木屑60%、小麦25%、生石灰l%~2%、石膏1.5%、腐殖质土15%。

  每个18mm×l80mm母种块转接6瓶原种,每瓶原种转接50袋~55袋栽培种。750mL菌种瓶生产原种,22℃~25℃暗室培育,15d~20d即可长满,25d可用于栽培种制作。栽培种选用14cm×28cm丙烯或乙烯菌种袋,25d长满,约30d即可使用。每公顷栽培种用量4500袋,大约300kg~3375kg菌种。

  4、“外援营养袋”配方

  “外援营养袋”配方:可以与栽培种相同,或者玉米芯40%、谷壳25%、小麦20%、生石灰1%一2%、石膏1.5%、腐殖质土15%。“外援营养袋”选用12cmx24cm乙烯或丙烯菌种袋。每公顷用量27000袋~30000袋。“外援营养袋”装袋后进行常规灭菌操作,待冷却后即可使用。

  带壳的高粱属于天然颗粒种培养基之一。利用高粱制作食用菌组织分离种基,具有分散性佳的优势,只需要一颗,就能扩接一支转代的母种管。

  1、高粱的处理

  高粱浸泡于由维生素B1、蜂蜜、复合肥、磷酸二氢钾、硫酸镁、石灰粉调配的石灰清液中数小时后,沥起,再投入沸水锅内煮15分钟,再沥起,即可装瓶,封口灭菌。

  2、食用菌分离体的处理

  将分离用的刀具浸泡于3%的双氧水中,再将要分离的菇体从菇柄一端撕开成二片,用分离刀从菇柄肉中切割一块1.5*1.5CM大小的菇肉,然后转用镊子夹起分离的菌肉浸泡于盛有3%双氧水的小杯中,浸泡时间为30秒钟左右,沥起。

  3、播种培养

  将瓶盖揭开,放入经过双氧水浸泡进行表面消毒处理的菇肉,再盖回盖子,即可进入恒温培养。这么小容量的培养瓶,在培养温度恒定在25度时,约一周左右就能满瓶。采用浸泡双氧水的方式对菇肉消毒处理,就不需要在接种箱内点燃酒精灯了。


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